سوال علمی هفته (شماره 2)

سوال:

چرا در الکتروفورز   از  اتیدیوم بروماید  استفاده میشود ؟

جواب:

EtBr  یا اتیدیوم بروماید ، ماده شیمیایی است که در رنگ آمیزی DNA  در عملیات الکتروفورز استفاده می شود . در حالت عادی بدون رنگ آمیزی با اتیدیوم بروماید امکان مشاهده DNA  بروی ژل وجود ندارد.

EtBr  مولکولی است با بار مولکولی مثبت (یک رنگ کاتیونی به حساب می آید)، یعنی بروی آن شارژ مثبت وجود دارد و در بین جفت بازهای DNA قرار می گیرد .

ساختمان DNA

 خاصیتی که EtBr  دارد اینست که با نور ماوراء بنفش بر انگیخته شده و از خود نور نارنجی- قرمز  تولید می کند . این موضوع به ما کمک می کند تا حضور و تجمع DNA را در یک نقطه شناسایی کنیم .

در ضمن به خاطر داشته باشید بجای EtBr  می توانید از متیلن بلو نیز برای رنگ آمیزی DNA  استفاده کنید . روش کار به این صورت است :   بعد از تمام شدن الکتروفورز ، ژل را در محلول 0.02 % متیلن بلو در آب قرار داده ( ۱ ساعت ) سپس با قرار دادن ژل در آب برای مدت یک شب آنرا  رنگبری نمائید . باندها در اندازه   20-50  نانوگرم در هر ستون به راحتی قابل مشاهده هستند .

تذکرمهم:   EtBr  ماده شیمیایی سرطانزا می باشد در هنگام کار با آن از دستکش استفاده کنید .